Kumbsa tests
Kas ir Coombs tests?
Coombs testu izmanto, lai noteiktu antivielas pret eritrocītiem (eritrocītiem). Antivielu noteikšanai izmanto tā saukto Coombs serumu, ko iegūst no trušu seruma un sensibilizē pret cilvēka antivielām.
Pārbaudi izmanto, ja ir hemolītiska anēmija, nesaderība ar rēzus stāvokli vai īsi pirms aizdomām par asins pārliešanu. Hemolītiskā anēmija ir anēmijas forma, un rēzus nesaderība raksturo asins grupas nesaderību.
Ir divi dažādi Coombs testa veidi, tiešais un netiešais tests atšķiras indikācijas un izpildes ziņā.
Kumbsa testa iemesli
Ja ir aizdomas par hemolītisko anēmiju, izmanto tiešo Kumbsa testu. Hemolītiskā anēmija apraksta anēmiju, kurā asins šūnas bojājumu dēļ priekšlaicīgi sadalās.
Autoimūnās slimībās, piemēram, sistēmiskā sarkanā vilkēde, reimatoīdais artrīts vai hroniska limfoleikoze, veidojas antivielas, kas ir vērstas pret paša organisma asins šūnām (tā sauktajiem eritrocītiem). Antivielu saistīšanās noved pie asins šūnu agrīnas sadalīšanās vai asins šūnu salipšanas traukos. Abas no tām noved pie hemoglobīna vērtības pazemināšanās.
Vēl viena tieša Coombs testa indikācija ir haemolyticus neonatorum slimība, šeit rēzusnegatīvas mātes ķermenī veidojas antivielas pret rēzus faktoru. Ja nedzimušajam bērnam ir rēzus pozitīvs raksturs, no mātes antivielas var iekļūt augļa cirkulācijā un sākt paaugstinātu tur esošo asins šūnu sadalīšanos. Jaundzimušie izceļas ar smagu anēmiju un dzelti.
Coombs testu regulāri lieto transfūzijas medicīnā. To lieto, lai noteiktu asins grupas pirms asins pārliešanas (nakts pārbaude), kurā nelielu asins paraugu sajauc ar dažādiem serumiem no A, B, AB un 0 asins grupas. Ja asinis paliek šķidras, pacienta asinis ir saderīgas ar atbilstošo asins grupu. Pārliešanu var veikt.
Netiešo Kumbsa testu var izmantot arī, lai pacienta ķermenī meklētu brīvas antivielas (antivielu meklēšanas testu), piem. maternitātes pārbaužu laikā, gatavojoties asins pārliešanai onkoloģiskiem pacientiem vai cilvēkiem, kuri jau ir saņēmuši asins pārliešanu.
Uzziniet visu par tēmu šeit: Rh neiecietība.
Preparāts
Gatavojoties Kombsa testam, vispirms tiek sagatavoti serumi ar antivielām, kuras jāpārbauda. Tos iepilda dažādās mēģenēs vai uzliek testa kartēm.
Ikdienas klīniskajā praksē, piem. ar pārbaudi pie gultas jau ir sagatavotas testa kartes, kuras var izmantot nekavējoties. Pēc tam no pacienta ņem asinis un sagatavo pārbaudei. Atkarībā no tā, kāda veida Kombsa tests tiek veikts, ir nepieciešamas pacienta asins šūnas vai serums (asiņu šķidrā daļa).
Secība
Ja tiek veikts tiešs Coombs tests, sarkanās asins šūnas tiek izfiltrētas no pacienta asinīm. Jāpārbauda, vai uz tām nav IgG tipa antivielu, kas organismā izraisa hemolītisko anēmiju vai asins grupu nesaderību. Coombs serumā ir antivielas pret cilvēka IgG antivielām. Maisījumu ilgstoši karsē (inkubē). Ja uz sarkano asins šūnu ir antivielas, tās salīp un tests kļūst pozitīvs.
Netiešais Kombsa tests sastāv no divām daļām. Mērķis ir noteikt antivielas, kas asinīs ir brīvas un nav saistītas ar asins šūnām.
Šoreiz šķidruma daļu (serumu) filtrē no pacienta asinīm. Vispirms pārbaudei serumā pievieno sarkanās asins šūnas. Ja serumā ir brīvas antivielas, tās saistīsies ar sarkano asins šūnu. Šī reakcija nav redzama. Tikai otrajā posmā, tāpat kā tiešajā Kombsa testā, tiek pievienots un uzsildīts Komssa serums ar antivielām pret cilvēka antivielām. Arī šeit risinājums salīp, ja rezultāts ir pozitīvs.
Novērtējums
Ja antivielas tiek kombinētas ar piemērotu Cooms serumu, antivielas serumā (asiņu šķidrā daļa) saistās ar pacienta antivielām. Antivielas ir Y formas, kas nozīmē, ka tās vienmēr var saistīt divus saistošos partnerus un tādējādi savstarpēji sasaistīt sarkanās asins šūnas. Tiek izveidota liela asins šūnu uzkrāšanās. Šie salipumi kļūst redzami - asinis aglutē (salīp) un tests ir pozitīvs.
Ja pacientam nav atbilstošu antivielu, serums paliek šķidrs. Jūs nevarat redzēt nekādas izmaiņas - tests ir negatīvs.
Kādas ir alternatīvas?
Alternatīva Coombs testam ir imunoloģiskā ELISA metode (enzīmu saistītais imūnsorbcijas tests), kurā noteiktas antivielas tiek apzīmētas ar enzīmu. Šo antivielu pievieno testa šķīdumam. Ja marķētās antivielas reaģē ar antivielām testa šķīdumā, saistītais enzīms tiek aktivizēts un iegūst krāsvielu. Atbilstošās mēģenes maina krāsu - tests ir pozitīvs.
Papildus ELISA procedūrai ir arī WESTERN blots, ko bieži izmanto kā pozitīva ELISA apstiprinošu testu.
